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    當前位置:網(wǎng)站首頁(yè) 解決方案
    分子研發(fā)技術(shù)平臺
    1、 POCT技術(shù)平臺

    POCT的基本原理是把傳統分析儀器微型化,操作方法簡(jiǎn)單化,使之成為便攜式和手掌式的設備。應用實(shí)時(shí)快速熒光定量PCR技術(shù)及核酸快速釋放技術(shù),通過(guò)擴增產(chǎn)物的熒光信號的變化實(shí)現對病毒核酸的監測。同時(shí),還可以實(shí)現在一個(gè)反應體系下檢測多種病原體,方便快捷,在臨床醫療、健康管理、軍事管理、生物應急、動(dòng)物衛生等場(chǎng)合均有廣泛的應用。POCT技術(shù)平臺在分子診斷的基礎上融入POCT快速的優(yōu)勢,進(jìn)行呼吸道系列產(chǎn)品的研發(fā)工作。


    POCT 產(chǎn)品具有三個(gè)方面的鮮明特色:

    1. 檢測時(shí)間:POCT產(chǎn)品縮短了從樣本采集、檢測到結果報告的檢測周期;

    2. 檢測空間:POCT 屬于在被檢測對象身邊的檢測;

    3. 檢測的操作者:POCT 的操作者可以是非專(zhuān)業(yè)檢驗師,甚至是被檢測對象本人。


    2、 反向點(diǎn)雜交法技術(shù)平臺

    PCR-反向點(diǎn)雜交法技術(shù)是采用PCR體外擴增和DNA反向點(diǎn)雜交相結合的基因檢測技術(shù)。該技術(shù)采用生物素標記的引物進(jìn)行靶序列的擴增,將擴增產(chǎn)物同固定在膜條上的特異性探針進(jìn)行雜交,一次雜交反應可同時(shí)檢測多種靶序列。廣泛應用于病原體檢測、基因突變檢測、基因分型及遺傳多態(tài)性檢測等方面,具有潛在的臨床應用價(jià)值。其技術(shù)原理如下圖所示。反向點(diǎn)雜交法技術(shù)平臺開(kāi)發(fā)的人乳頭瘤病毒基因分型(25型)檢測試劑盒(PCR-反向點(diǎn)雜交法)可以針對女性宮頸脫落上皮細胞樣本中的25種HPV進(jìn)行檢測和分型。


    技術(shù)特點(diǎn):

    1. 該技術(shù)具有快速、簡(jiǎn)便、高靈敏度的特點(diǎn),同一反應管可以檢測多種靶標片段,在病原體檢測、基因突變檢測、基因分型及遺傳多態(tài)性檢測中具有顯著(zhù)的優(yōu)勢。

    2. 特異性高。擴增產(chǎn)物同探針結合具有高特異性。

    3. 適用范圍廣。廣泛應用于病原體檢測、基因突變檢測、基因分型及遺傳多態(tài)性等多個(gè)領(lǐng)域,具有潛在的臨床應用價(jià)值。

    4. 操作簡(jiǎn)單。反應液為預分裝試劑,直接加入模板就可進(jìn)行擴增。


    3、甲基化技術(shù)平臺

    基因甲基化是遺傳表觀(guān)學(xué)的重要組成部分。甲基化修飾異常是腫瘤發(fā)生過(guò)程中的早期事件,是細胞的遺傳本質(zhì)和外界環(huán)境影響共同作用的結果?;虻膯?dòng)子區域發(fā)生甲基化修飾后,往往使得該基因的表達下調,隨之影響了細胞內一系列的分子事件,最終導致細胞發(fā)生癌變,圖1為宮頸癌變過(guò)程。利用分子診斷方法對腫瘤DNA甲基化程度進(jìn)行測定,可以輔助診斷腫瘤及判斷預后,對腫瘤的篩查和風(fēng)險評估、早期診斷、預后診斷及治療檢測具有重要的意義。


    金迪安分子研發(fā)團隊針對已有的HPV和TCT產(chǎn)線(xiàn)布局,利用新建的甲基化技術(shù)平臺開(kāi)發(fā)宮頸癌甲基化檢測產(chǎn)品。圖2為金迪安團隊開(kāi)發(fā)的宮頸癌甲基化檢測產(chǎn)品實(shí)驗操作流程為:標本采集/暫存→脫落細胞gDNA提取→DNA濃度檢測→亞硫酸鹽化學(xué)轉化→bisDNA純化→熒光PCR反應→結果判讀。


    4、探針熔解曲線(xiàn)技術(shù)平臺

    探針熔解曲線(xiàn)技術(shù)是通過(guò)實(shí)時(shí)監測溫度變化過(guò)程中探針的熒光強度變化情況,從而得到熒光強度隨溫度變化的曲線(xiàn),然后通過(guò)對熒光強度隨溫度的變化進(jìn)行轉換,得到直觀(guān)的探針熔解曲線(xiàn)峰圖。熒光探針與不同靶序列雜交,形成的雙鏈雜交體的穩定性也不同,故具有不同的Tm值。其技術(shù)流程如下圖1所示。探針熔解曲線(xiàn)技術(shù)平臺針對藥物代謝基因、人類(lèi)白細胞抗原基因以及HPV感染進(jìn)行檢測,在SNP檢測、基因多態(tài)性分型以及HPV高低危分型等方面有廣泛應用。


    技術(shù)特點(diǎn):

    1. 檢測通量高。同一反應管可檢測十幾種甚至更多靶標片段,在病原體分型檢測、多重耐藥基因檢測、用藥指導基因篩查等方面具有顯著(zhù)優(yōu)勢。

    2. 對SNP位點(diǎn)識別特異性高??梢苑直娉霭行蛄泻蜔晒馓结樒ヅ涑潭?對SNP位點(diǎn)就有高的檢測特異性。

    3. 適用范圍廣??稍谠谀[瘤、遺傳和微生物等多個(gè)領(lǐng)域中進(jìn)行應用。

    4. 成本低廉。在檢測相同數量靶序列的情況下熒光探針熔解曲線(xiàn)技術(shù)所需的熒光探針數量遠少于傳統實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)。


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